锦鸡儿治疗大鼠佐剂性关节炎机制的实验研究

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1、锦鸡儿治疗大鼠佐剂性关节炎机制的实验研究任建梅，胡荫，包艳红，吴骏，关颍【摘要】目的用大鼠佐剂性关节炎（AA）动物模型，探索锦鸡儿对大鼠关节炎的治疗机制。方法用弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型，用容积法对大鼠足部体积进行测定。结果经锦鸡儿治疗后，能明显改善AA大鼠的关节炎症状，可抑制大鼠的足肿胀和继发炎症。关节炎肿胀度和关节炎指数均明显低于对照组（P0.05;P0.001）。关节液中IL-1、IL-6水平明显低于AA大鼠组。结论锦鸡儿煎剂对佐剂性关节炎有良好的治疗作用，其可降低炎症区域内的含量，应是锦鸡儿抗炎作用的机制之一。【关键词】锦鸡儿煎剂;佐剂性关节炎;关节肿胀度;关节炎指数;

2、IL-1;IL-6锦鸡儿是一种植物，具有祛风、活血利湿等功效。中国人民解放军第二九一医院曾报道用锦鸡儿治疗系统性红斑狼疮，取得较好疗效，且无副作用〔1〕。包头医学院第一附属医院也曾对锦鸡儿治疗类风湿性关节炎进行了临床观察，证明锦鸡儿属植物在缓解本病的症状上有良好的治疗效果，长期应用未见不良反应〔2〕。实验药理学研究证明锦鸡儿具有抗炎作用及免疫功能抑制作用〔3～5〕。日本学者SnsumuKitanaka等也证明锦鸡儿乙醚提取液对小鼠角叉菜胶性足跖肿胀有明显抗炎作用〔6〕。大鼠佐剂性关节炎（adguvantarthritis,AA）是常用的实验模型之一，其组织病理及血液变化与人类相似，常用

3、于抗风湿药物的筛选和研究〔7〕。本文利用此模型以探索锦鸡儿对大鼠关节炎治疗的机制，现报告如下。1材料与方法1．1动物in，将2次水煎剂合并后调整浓度为500%。弗氏完全佐剂（Frend’spmeteadguvant，FCA），IL-1、IL-6均为美国sigma公司产品。1．2．1大鼠佐剂性关节炎（AA）的制备〔8〕及观察指标将大鼠右后肢拉直，用1ml注射器自足跖中部皮下向下注射弗氏完全佐剂，每只大鼠注射0.1ml（100mg/ml）。1．2．2动物分组与给药取30只大鼠雌雄各半，随机分为正常对照组、蒸馏水组、锦鸡儿煎剂组，每组10只。造模前用容积法测量正常状态下大鼠右后肢足跖容积一次

4、，造模后第3天开始灌胃给药，2ml/100g体重，每天1次，连续18天。造模后第5、11、15、21天各测量足跖容积1次，计算大鼠右后足跖肿胀度（肿胀度=致炎后足跖容积-致炎前足跖容积）。在造模后第11、15、19天观察累及关节炎指数，取平均值与对照组比较，进行统计学检查。1．2．3关节炎指数（AI）计算参考薛彬的方法〔9〕。根据未注射的其余3只肢体的病变程度以及趾间跖间是否发炎累及积分算出关节炎指数。对前肢的腕、掌指关节，后肢的踝、趾关节打分。标准如下，0分：无红肿；1分：小趾关节红肿；2分：指关节和足趾均红肿；3分：踝关节以下红肿；4分：包括踝关节全部红肿。把每个关节的得分累积起来

5、即为每只大鼠的关节指数。1.2.4关节液的获取致炎21天，处死大鼠，在非致炎侧踝关节上方0.5cm处剪下肿胀足爪，剥下皮肤，纵向切开，放入盛有5ml生理盐水的试管中，于4℃浸泡过夜，离心取上清，－20℃保存待测。IL-1、IL-6含量检测采用夹心法，检测步骤按产品说明书进行。1．2．5统计学处理均以x±s表示，两样本均数比较采用t检验。2结果2．1锦鸡儿对大鼠关节肿胀的影响见表1。Wistar大鼠注射佐剂后，第2天出现明显肿胀，1周后逐渐消退，12天时再次肿胀并产生全身炎症变化，在耳朵、尾部、前肢以及左后肢均出现红斑、肿胀、血管周围炎等，大鼠爬行困难，活动、进食均减少，皮毛暗淡无光泽。

6、治疗18天后锦鸡儿组大鼠所出现的症状相对较轻，进食、活动情况较好。与其他组大鼠足肿胀度的平均值做比较，锦鸡儿组大鼠足肿胀度明显小于对照组，差异有显著性。表1锦鸡儿煎剂对大鼠关节炎肿胀度的影响注：与AA对照组比较，P＜0.052．2锦鸡儿对大鼠关节炎指数（AI）的影响见表2。治疗18天后锦鸡儿组大鼠关节炎指数较AA对照组大鼠比较明显降低，差异有显著性。表2锦鸡儿煎剂对大鼠关节炎指数（AI）的影响注：与AA对照组比较，P＜0.0012．3锦鸡儿煎剂对大鼠关节液内IL-1、IL-6含量的影响锦鸡儿治疗21天处死动物，监测关节液内IL-1、IL-6的含量。结果表明经锦鸡儿治疗后大鼠关节液内IL

7、-1、IL-6含量明显降低。见表3。表3锦鸡儿煎剂对大鼠关节液内IL-1、IL-6含量的影响注：与正常对照组比较，**P＜0.001；与AA对照组比较，*P＜0.053讨论锦鸡儿是内蒙地区盛产的一种植物，药用其根和茎。其根性平，味微辛，具有祛风、活血利湿等功能。有研究表明〔3～6〕锦鸡儿有一定抗炎与免疫抑制作用。临床上用于治疗红斑狼疮〔1〕、类风湿关节炎〔2〕均取得良好效果。大鼠佐剂性关节炎是人类RA的动物模型，其原发病变主要表现为致炎局部的急