丹参营养器官中脂溶性成分的动态变化规律论文

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1、丹参营养器官中脂溶性成分的动态变化规律论文秦海燕，索志荣，刘文哲【摘要】目的测定丹参营养器官中丹参酮I和丹参酮ⅡA的含量，并揭示丹参生长过程中，丹参酮I和丹参酮ⅡA的动态变化规律。方法采用反相高效液相色谱法，以ZorbaxSB-C18（150mm×4.6mm,5.0μm）为色谱柱；甲醇-0.4%磷酸为流动相，梯度洗脱，流速为1.0ml/min；二极管阵列检测器：检测波长分别为246,270nm；柱温为30℃。结果丹参叶和茎中均未检出丹参酮I和丹参酮ⅡA.freelinethecontentofTan

2、shinoneⅡAandtanshinoneⅠindifferentvegetativeorgansofSalviamiltiorrhizaBgeanddiscovertheaccumulationofTanshinoneⅡAandtanshinoneⅠanceliquidchromatographyedonZorbaxSB-C18（150mm×4.6mm,5.0μm）columnbygradientelution.ThemobilephaseconsistedofCH3OH-4%aqueousph

3、osphoricacid.Theflol/min.Thedetectionandcolumntemperatureandtheleaf.TanshinoneⅡAandtanshinoneⅠroughlyassumed"thesinglepeak"intherootulationinDanshenroot.KeyiltiorrhizaBge;Vegetativeorgans;Tanshinone;Highperformanceliquidchromatography丹参（SalviaMiltiorrh

4、izaBunge）为唇形科（Labiatae）鼠尾草属多年生草本植物，传统以根入药。其活性成分可分为脂溶性的二萜醌类和水溶性的酚酸类成分，邻醌型的丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA在丹参中的量较高,有较强的生理活性,是丹参主要有效成分之一［1］，具有扩张血管,降低血液黏度,抗血小板聚集,改善微循环,保护心肌细胞以及抗菌消炎、抗癌等作用［2］。目前，关于丹参药用成分的药理、提取工艺、检测方法的研究较多，但有关丹参药用成分在整个营养器官动态变化的研究很少。本文采用高效液相色谱－二极管阵列检测器（HPLC－DAD），研

5、究了丹参脂溶性成分丹参酮I和丹参酮ⅡA在根中的积累规律，旨在为丹参的种植、管理、采收、品质鉴定及控制丹参药材质量提供理论依据。1仪器与试药HP1100高效液相色谱仪（美国Aglient公司），包括四元梯度泵（G1311A），二极管阵列检测器(G1315A)；DL-180型超声清洗器(浙江省象山县石浦天电子仪器厂)；FZ102微型植物试样粉碎机（河北省黄骅市齐家务振兴电器厂）；Milli-QG超纯水制备仪（美国Millipore公司）。甲醇为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯。丹参酮I和丹参酮ⅡA对照品

6、纯度均大于99.5%，购自中国药品生物制品检定所。丹参（SalviaMiltiorrhizaBunge）实验材料采于西北大学苗圃内的栽培植株（2006年3月自商洛天士力丹参药材基地移栽）。于2007-04～12期间每月20日以随机抽样的方式选择丹参植株6株，摘取各样品株的根、叶片和茎，分别整理，60℃的恒温箱内烘干至恒重，研细，过6号筛后备用。2方法2.1对照品溶液的配制分别精密称取对照品丹参酮I1.1mg和丹参酮ⅡA2.2mg，分别置10ml量瓶中，用二氯甲烷－甲醇（V/V=1/9）混合溶剂溶解并

7、定容，摇匀，得丹参酮I浓度为0.11mg·ml-1和丹参酮ⅡA浓度为0.22mg·ml-1的单一成分对照品溶液，作为储备液，其它不同浓度的对照品溶液由储备液稀释得到。2.2供试品溶液的制备精密称量丹参根、茎、叶粉末约120mg，置25ml烧瓶中，准确加入二氯甲烷－甲醇（V/V=1/9）混合溶剂10ml，称重，超声提取30min，冷却至室温，再称重，用提取液补足减失的质量，摇匀，取适量用0.45μm微孔滤膜滤过，即得丹参脂溶性成分供试品溶液。2.3色谱条件美国ZorbaxSB-C18（150mm×4.

8、6mm,.freel）色谱柱；流动相为甲醇－0.4%磷酸，梯度洗脱，其时间程序为0→10→13min，甲醇体积分数相应为72%→87%→72%，流速1.0ml·min-1；二极管阵列检测器：检测波长分别为246,270nm；柱温30℃。丹参酮I和丹参酮ⅡA的保留时间分别为8.1，10.8min。对照品和丹参样品色谱图见图1。2.4线性关系考察精密移取“2.1”项所配的丹参酮I和丹参酮ⅡA储备液一定体积于10ml量瓶中，稀释，配成丹参酮I浓度分别为0.44，0.88，1