川芎嗪对大鼠脑缺血-再灌注肝损伤的影响论文

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1、川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注肝损伤的影响论文.freelethylpyrazine，TMP）是从川芎中提出的一种生物碱，具有解痉、扩管、降压等广泛的生物作用，已泛应用于心血管疾病的治疗。岑得意等［1］用大鼠脑梗塞模型观察川芎嗪对大鼠脑梗塞的作用，结果显示川芎嗪可显著改善大鼠异常神经症状和抑制ALP活性的下降，显著抑制ADP致血小板的聚集。笔者以往的研究表明［2］，川芎嗪对脑缺血/再灌注损伤具有保护作用，TMP可减少脑缺血/再灌注损伤中皮层和海马NO的生成，降低NO的损害作用，从而对脑缺血产生保护作用，对癫痫大鼠模型神经细胞的损

2、伤具有保护作用［3，4］。脑缺血/再灌注损伤是重型颅脑损伤病人减压术后的一种常见病症，由此而引发的多脏器功能损害更使病情复杂化，增加了救治难度。肝脏作为最易受累的器官之一，在临床和实验中受到人们的高度重视。于是我们采用Pulsinelli等的方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注模型，旨在研究川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注肝损伤的作用，并探讨其可能机制，从而为临床预防和治疗脑缺血/再灌注损伤提供实验依据。1材料与方法1.1药品及试剂川芎嗪注射液40mg/2mL（北京第四制药有限公司生产，批号20060701），SOD，GSH-PX，M

3、DA，Ca2+-Mg2+-ATP酶试剂盒（北京中山生物技术有限公司生产）。1.2实验动物与分组健康雄性P+I/R），于术前30min经尾静脉给予川芎嗪8mg/kg，其余两组同时给予等体积生理盐水。1.3模型制备与标本采集缺血/再灌注组和川芎嗪+缺血/再灌注组按Pulsinelli等的方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注模型，即20%乌拉坦2ml/kg腹腔麻醉，电灼凝固双侧椎动脉，夹闭双侧颈总动脉，造成全脑缺血，30min后松夹，开放双侧颈总动脉灌流60min。对照组仅做动脉分离，不进行电凝和夹闭。全部动物于实验1.5h末经髂动脉

4、取血并迅速放血致死，取肝左中叶组织匀浆，同时取少许肝左中叶组织行光、电镜观察。1.4指标测定SOD活性用邻苯三酚自氧化法检测［5］，MDA含量测定用改良硫代巴比妥酸（TBA）比色法测定［6］，5.5，二硫对二硝基苯甲酸（DTNB）比色法测定GSH-PX［7］，定磷法测定Ca2+-Mg2+-ATP酶［8］。光镜检查:取肝组织经10%甲醛固定，石腊包埋切片，HE染色，观察切片。电镜检查:肝组织用生理盐水漂洗后2.5%戊二醛固定，送电镜室，经四氧化锇双固定，脱水、包埋、切片等操作后，在日立H-600透视电镜下观察并拍片。1.5统计

5、学分析所有数据均用均数±标准差（x±s）表示，组与组之间采用t检验。2结果2.1肝组织中SOD、GSH-PX及MDA含量的变化大鼠脑缺血/再灌注后肝组织SOD、GSH-PX活性下降，而MDA含量明显上升，与假手术对照组比较有显著性差异（P0.01）。川芎嗪治疗组肝组织中MDA含量明显低于缺血再灌注组（P0.01），SOD、GSH-PX的含量均明显高于缺血再灌注组（P0.01）。见表1。表1各组大鼠肝组织SOD、GSH-PX、MDA、Ca2+-Mg2+-ATP酶的测定结果（略）注:△与假手术对照组比较，P0.01;与缺血再灌注

6、组（I/R）比较，P0.01。2.2肝组织ATP酶活性变化大鼠肠缺血再灌注后肝组织Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降，与假手术对照组比较有显著性差异（P0.01）。川芎嗪治疗组肝组织中Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显高于缺血再灌注组（P0.01）。见表1。2.3肝细胞形态学改变光镜下假手术对照组肝小叶正常，肝细胞索清晰，围绕中央静脉呈放射状排列;缺血再灌注组肝小叶结构正常，肝细胞水肿，肝窦淤血变窄;川芎嗪治疗组肝小叶结构正常，肝细胞索及肝窦排列整齐，未见肝细胞水肿。电镜下假手术对照组肝细胞器正常;缺血再灌注组肝细胞有空

7、泡形成，线粒体肿胀，胞浆疏松化，部分肝细胞核固缩、变小;川芎嗪治疗组肝细胞损伤减轻，内未见空泡，线粒体稍肿胀。3讨论正常体内产生一定量自由基，可被体内自由基清除系统如SOD、过氧化氢酶等迅速清除，不致于堆积过多引起组织细胞损伤［9］。在病理情况下，机体内自由基清除系统功能下降，自由基氧化生物膜的不饱和脂肪酸，产生脂质过氧化，使器官组织损伤。MDA是氧自由基引起的细胞膜脂质过氧化反应的终末产物，其含量反映脂质过氧化程度并可间接反映自由基的含量。SOD的降低是由于缺血缺氧使SOD生成不足、清除过多氧自由基时的消耗及炎症反应时中性

8、粒细胞携带血浆中的SOD进入炎症部位等。本实验结果提示在脑缺血/再灌注过程中，大鼠肝组织反映自由基生成的脂质过氧化物MDA增加，而清除自由基的SOD活性减弱，脂质过氧化引起的损伤不断积累，导致肝组织损伤。目前动物实验表明川芎嗪对肢体组织［10］、脑组织［11］、肾脏组织和心肌组织缺血性损害