反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2oβd葡萄糖苷的含量论文

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1、反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量论文反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量时间:2016-07-1001:49:47阅读:次作者:freelm×3.9mm，4μm)，流速0.8ml·ml-1，乙腈∶水（20∶80）为流动相，检测波长为320nm。结果葛根素的线性范围为0.3056～1.528mg·ml-1，r=0.9997，平均回收率为98.15%.freell-1，r=0.9995，平均回收率为97.46%，RSD＝2.12%（n=6）

2、。结论该方法简便、快速、准确，适合该胶囊中葛根素和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量测定。【关键词】反相高效液相色谱法葛根素2,3,5,4'四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofpuerarinand2,.freeln(4μm,150mm×3.9mm)l·ml-1,thedetection.ResultsThelinearrangeg·ml-1(r=0.9997)，theaveragerecoveryl-1(r=0.9995)，theaverag

3、erecoveryethodissimple,sensitive,accurateandsuitableforthedeterminationofpuerarinand2,3,5,4'-Tetrahydroxy-stibene-2-O-β-D-glycosideinKangnaoshuaicapsule.Key的滤膜过滤。2方法和结果2.1色谱条件m×150mm，4μm），流动相为乙腈∶水（20∶80），流速为0.8ml·min-1，柱温40℃，检测波长320nm。2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品15.28mg置5ml量瓶中，加30%乙醇溶解并定容至刻

4、度，摇匀，即得浓度为3.056mg·ml-1的葛根素对照品溶液；精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品5.12mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为0.0512mg·ml-1的2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液。2.2.2样品溶液的制备取抗脑衰胶囊20粒,倾取内容物，研细，精密称取细粉1.0g，置干燥锥形瓶中，加入甲醇适量，超声30min，室温下过滤，滤液置80℃水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。2.2.3阴性样品溶液

5、制备按处方配制不含葛根、何首乌的阴性样品，按“2.2.2”项操作方法制备阴性样品溶液。2.3干扰性实验取葛根素对照品溶液、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液各5μl，在上述色谱条件下进样测定。结果见图1。由图1可知样品中的其他组分不干扰葛根素和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的测定。2.4线性关系实验2.4.1葛根素分别精密吸取葛根素对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，分别置于2ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件，依次进样10μl，测定峰面积，将所得峰面积与进样量进

6、行线性回归，回归方程为Y=2.188×107X-1.191×106(r=0.9997)。结果表明葛根素在0.3056～1.528mg·ml-1范围内线性关系良好。图1抗脑衰胶囊高效液相色谱图（略）2.4.22,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷分别精密吸取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0ml置25ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件，依次进样10μl，测定峰面积，将所得峰面积与进样量进行线性回归，回归方程为Y=6.136×106X-1.787×103(r=0.9995)。结果

7、表明2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在1.024～8.192μg·ml-1范围内线性关系良好。2.5精密度实验取浓度为0.9168mg·ml-1的葛根素对照品溶液，重复进样6次，10μl/次，结果峰面积RSD为0.86%（n=6）；取浓度为0.0512mg·ml-1的2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液，重复进样6次，10μl/次，结果峰面积RSD为1.16%（n=6）。2.6重现性实验取同一批号样品6份，按样