论述rhd阴性血源在我国的现状以及保存方法

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1、论述RhD阴性血源在我国的现状以及保存方法-->论述RhD阴性血源在我国的现状以及保存方法关键词　红细胞RhD阴性甘油保护液温度RhD阴性血源匮乏,在我国汉族人群中RhD阴性仅占0.3%左右[1]。零上温度保存血液最长时间为35d[2]。论文代写由于RhD阴性患者的数量相对较少,血液不能及时使用将报废。采用-80℃超低温冰箱保存RhD阴性红细胞以延长保存时间。现就保存条件和操作中应注意的问题报道如下。1　材料与方法1.1　RhD阴性血的　来本中心无偿献血者用血清学方法筛选出RhD阴性者,然后检测其

2、RhD基因,RhD基因完全缺失者作为RhD阴性血的。1.2　分组　取不同采集时间的RhD阴性全血按其新鲜程度分成4组:1~d组,3~d组,5~d组,7~9d组,每组20袋血采用1号保护液进行冷冻红细胞制备,观察保存效果。另用40袋1~3d全血,每袋血分成体积相同的2份分别用1和2号保护液进行冻存,观察2种保护液保存效果是否存在差异。1.3　冷冻保护液的组成　1号保护液的组成为:甘油790g/L,葡萄糖80g/L,果糖10g/L,乙二胺四乙酸二钠23g/L;2号保护液的组成为:葡萄糖57.1g/L,

3、乳酸钠0.14mol/L,氯化钾5mol/L,磷酸氢二钠5mol/L。1.4　保存方法1.4.1　冷冻红细胞的制备:经检验合格的全血200ml,4℃2500r/min离心7min,去除血清和白膜,于压积红细胞中缓缓加入1号保护液混匀后室温静置30min,置于-80℃超低温冰箱中保存。将采集1~3d的合格全血200ml在4℃2500r/min离心7min,去除血清和白膜,将压积红细胞平均分成2份,分别加入1和2号保护液混匀,室温静置30min,置于-80℃超低温冰箱中保存。1.4.2　解冻与洗涤:将

4、冷冻红细胞从-80℃超低温冰箱中取出,置于37~40℃的水浴中轻轻摇动使其快速融化,融化后,缓缓加入等体积的生理盐水溶液室温静置5min。加入60g/L的羟乙基淀粉溶液100ml静置5min,4℃2500r/min离心7min去除上清,留红细胞,以上步骤重复3次分离用离心机转速温度均经过校验以排除影响。红细胞中加入生理盐水100ml留样送检。1.5　检测方法　参照《中国输血技术操作规程》(血站部分)[2]解冻红细胞质量标准,冷冻红细胞质量标准,依据中国卫生部颁布的“中国输血技术操作规程”制定的质量

5、标准:红细胞冷冻保存解冻后经洗涤①红细胞回收率>80%;②甘油含量2　结果2.1　血液新鲜程度对冷冻红细胞质量的影响　1~3d组合格18袋,不合格2袋为红细胞在洗涤过程中丢失过多回收率不合格,总合格率为95%;3~5d组合格16袋,不合格4袋其中2袋为体外溶血实验不合格、2袋体外实验及红细胞回收率均不合格,总合格率为80%;5~7d组合格14袋,不合格6袋其中3袋为体外溶血实验不合格、2袋为体外实验及红细胞回收率均不合格、1袋体外溶血实验红细胞回收率及游离血红蛋白含量均不合格,总合格率为65%;7

6、~9d组合格8袋,不合格12袋其中8袋体外溶血实验不合格、2袋体外溶血实验红细胞回收率及游离血红蛋白含量均不合格、1袋体外溶血实验红细胞回收率均不合格、1袋红细胞回收率不合格。　　1~d与3~d组合格率比较,u=1.60,P>0.05无显著差异;1~d与5~d组合格率比较,u=2.31,P2.2　不同保护液对冷冻红细胞质量的影响　1号保护液的合格率为92.5%。2号保护液合格率为65%,u=3.19P3　讨论红细胞低温保存的关键在于防止红细胞在低温条件下的损伤。低温状态下水结冰使细胞内外所产生的高

7、浓度电解质作用于细胞膜,引起脂蛋白复合物的变性和部分类脂质的丢失,增加了细胞对阳离子的通透性,并使细胞膜上形成一些小孔。同时细胞内形成的冰晶可使细胞膜破损。细胞缩水导致蛋白质变性[3]。甘油可通过细胞膜使细胞内液的冰点降低,增加未冻水量,未冻水中盐的浓度降低,有效地保护了细胞器、蛋白质不被破坏。红细胞采集后,随着在体外保存时间的延长,红细胞膜上的脂蛋白和脂质逐渐丧失,脆性增加。本实验表明红细胞的新鲜程度对冷冻保存质量的影响很大,血液采集后放置1~3d制备冷冻红细胞的质量差异不大,5d以后制备红细胞

8、膜脆性明显增加,因此在有条件的情况下尽量使用新鲜的血液进行制备减少红细胞离体后在零上温度保存的时间,可确保冷冻红细胞的质量。在操作过程中避免强烈震荡,在保证分离质量的条件下尽可能降低离心速度和时间。加入保护液时要慢并放置足够的时间使保护液均匀地渗入细胞内。解冻要迅速,在尽量短的时间内融化,摇动要轻,使血袋受热温度均匀,不可用手挤压血袋以免因机械作用使红细胞溶血。去甘油时加生理盐水及羟乙基淀粉溶液一定要缓慢,并放置平衡至少5min。羟乙基淀粉对细胞膜有保护作用,在整个过程中要注意避免