03---09年江南大学发酵复试题

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1、03年江大发酵复试题一，如何从一直微生物基因组中分离和鉴定未知功能的基因？二，选择一种工业上常用的丝状真菌，说明相关基因在其形态发生和次生代谢产物形成中的作用和意义？三，实验室中一盛麦芽汁的三角瓶，未杀菌开口放置数日，结果长出许多微生物。如何初步确定存在哪几大类微生物？四，如何从一个新分离的微生物菌株中克隆编码某一酶的新基因？05年试题名词解释DE初级代谢产物次级代谢产物生理酸（碱）性物质问答培养基的一般要求培养基的组成必需满足细胞的生长和代谢产物所需的元素，并能提供生物合成和细胞维持活力所需要的能量培养基的设计（1）作出细胞生长和产物形成的化学计算的平衡碳源和能源+氮源+其他需要

2、→细胞+产物+CO2+H2O+热量•通过计算可以获得生产一定数量的细胞时所需的营养物的最低数量。在了解一定数量的生物体所能产生的产物数量后；就有可能计算出形成产物时所需的底物数量。–这些培养基的组份的数量仅仅是供给细胞形成产物，而不包括生成细胞所需的营养。所有上述各项数量，是不易获得其精确的数字。（2）组成微生物的元素包括C、H、O、N、S、P、Mg和K（见下表），这些元素都要在方程式中予以平衡–在培养基中有些元素的含量往往超过需要量，如P和K。而其它元素含量则接近最低值(如Zn，Cu等)。在许多培养基中增加磷酸盐浓度，其用意是增加培养基的缓冲容量，这一点，在设计培养基时要引起注意

3、。–发酵培养基的组成成分–水–碳源–氮源–无机盐–维生素–缓冲剂–前体和代谢调节剂–消沫剂–2.工业微生物菌种的选育方法发酵强度以及提高方法原理固液分离方式特点生物技术如何发挥其在能源可持续发展的作用以任意发酵产品为例说明清洁生产实现过程06年名词解释发酵工程：应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。固定化细胞 ：固定化细胞就是被限制自由移动的细胞，既细胞受到物理化学等因素约束或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并具备能被反复或连续使用的活力。是在酶固定化基础上发展起来的一项技术。初级代谢产

4、物 超临界萃取 临界氧浓度问答1为何前体物质，抑制剂促进剂对物质生成有利•发酵培养基中某些成分的加入不促进微生物的生长，只是有助于调节产物的形成，这些添加的物质包括前体，抑制剂和促进剂。一、生物合成的前体物质•指某些化合物加入到发酵培养基中，能被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，其自身结构并无多大变化，但产量却因前体的加入有较大提高。二、抑制剂•加入后会抑制某些代谢途径的进行，使另一途径活跃，从而获得人们所需要的某种代谢产物，或使正常代谢的某一代谢中间物积累。•最初应用于甘油发酵，抗生素工业应用最多。三、促进剂•指那些既不是营养物，又不是前体，但能提高产量的添加剂，如酶生产

5、中的诱导物或表面活性剂等。–诱导剂能增加细胞的产酶速度，提高产酶量，但不能从根本上改变细胞原有的蛋白质模板，包括酶的底物，底物类似物，及被转化为诱导物的前替物质。–表面活性剂（洗涤剂，吐温等）：可以增加酶的产量，机理不十分清楚，一般认为是因为：–改变了细胞膜的通透性–同时增强了氧的传递速度，改变了菌体对氧的有效利用2高温短时灭菌原理：每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。•杀死微生物的

6、极限温度称为致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。•微生物的热阻：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值湿热灭菌的优点•蒸汽来源容易，操作费用低，本身无毒；•蒸汽有强的穿透力，灭菌易于彻底；•蒸汽有很大的潜热；•操作方便，易管理。3动植物细胞培养与微生物细胞培养的过程区别•动物细胞无细胞壁，且大多数哺乳动物细胞附着在固体或半固体的表面才能生长；对营养要求严格，除氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外，还需有血清。动

7、物细胞对环境敏感，包括pH、溶氧、温度、剪切应力都比微生物有更严的要求，一般须严格的监测和控制。•植物细胞对营养要求较动物细胞简单。但由于植物细胞培养一般要求在高密度下才能得到一定浓度的培养产物，以及植物细胞生长较微生物要缓慢，长时间的培养对无菌要求及反应器的设计也提出特殊的要求。4与自然细胞相比工程菌细胞的培养有何特点答：工程菌工业化培养中，产物的产率往往比实验室培养规模为低。•为提高工程菌体表达效率，需采取适当措施，提高重组DNA在受体细胞内的拷贝数及促进表达产物