结核菌素试验(2017)

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1、结核菌素试验（一）定义：由人工培养的结核杆菌的培养滤液制成的一种生物制品，其有效成份为结核蛋白。（二）使用：≥3月的婴幼儿接种卡介苗前筛选。测试卡介苗接种后是否有效，于接种后12周进行，阳性者表示接种成功。（其他略）（三）品种：OT、PPD（TB-PPD、BCG-PPD等）。（四）规格：1ml/支、10人份，每毫升含PPD1μg，相当于50个国际结素单位。一、结核菌素（Tuberculin）1．旧结素（OldTuberculinOT）：以Koch最初方法制成的结素。由于其制作简易，性质稳定，所以在较长时间

2、内一直使用。缺点是含杂质多，不易标准化，不同生产单位或同一单位生产的各批效价不一。2．纯蛋白衍化物（PureProteinDerivatinePPD）：用化学方法从结核菌培养液中提取出较纯结核蛋白而制成的一种固体状结素。其纯度高，特异性强，可以标准化，因此逐步取代了旧结素。（一）方法；皮内注射法（Mantoux法），最大优点是剂量和结果都较准确。（二）部位：左前臂掌侧中间。如有疤痕、血管瘤等无法注射时，可换臂，但需注明。（三）剂量：0.1ml/人次。（四）观察：72小时。二、皮试结素反应属于细胞介导的迟发

3、型（Ⅳ）变态反应，是由结核蛋白与携带免疫信息的小淋巴细胞（致敏T淋巴细胞）接触后产生的变态反应。结核蛋白在生产提取过程中发生部分变性，抗原成份已不完整，是半抗原，其本身不能使动物致敏，只有加上腊质丁（WaxD）才能使动物致敏，而腊质丁正是结核菌外壳的组成成份。故只有当机体受到结核菌或卡介苗感染后方能形成致敏T淋巴细胞而对结素产生反应，而非感染者不对结素产生反应。三、反应机制结素反应共有二个阶段，第一个阶段是特异性阶段。当结素进入致敏机体后，与循环中的致敏T淋巴细胞接触，刺激T淋巴细胞释放大量免疫活性物质—

4、—淋巴因子，如巨噬细胞游走抑制因子、转移因子、皮肤反应因子、趋化因子、巨噬细胞凝集因子、淋巴毒素等。第二个阶段是非特异性阶段。释放出的这些活性物质可以促使巨噬细胞向有反应原的地方游走、聚集、发育、繁殖，可以使局部血管扩张，通透性增加，导致局部充血、渗出，更多的细胞从血管向外浸润，在24小时后局部出现红晕和硬结，48—72小时达到高峰，形成肉眼可见的局部皮肤反应，反应强烈者可出现水泡、溃疡，严重者可见前臂肿胀，疼痛、发热、周身不适等。红晕是局部血管扩张所致，对判断机体致敏无意义，而硬结是水肿加巨噬细胞浸润所

5、致，是判断机体致敏的依据。1．发热（T＞37.5℃）2．各种传染病及恢复期。3．各种器质性疾病如心脏、血管系统、肾脏、肝脏和胃肠等疾病急性期。4．身体极度虚弱者。5．患有局部或全身性皮肤病。6．防御机制不健全者，如免疫缺陷，丙种球蛋白缺乏者。7．其他预防接种不到二周者。8．本人或家属有过敏史或变态反应史。9．神经及精神不正常，易出现晕厥、休克、癫痫等情况者。四、禁忌症1．试验前先核对药名、剂量、有效期及婴幼儿，如有沉淀、安瓿破损及过期者不得使用。2．用75%酒精消毒皮肤。3．应用一次性注射器，刻度和针孔斜

6、面一致向上与皮肤平行刺入皮内，缓慢准确地注射0.1ml（含5UPPD）呈直径约为6-10mm大小白色隆起，不要揉搓，会自行消退，不要用酒精棉球（签）按压针眼。五、操作4．干扰因素：a、光线：直接日光照射10分钟，结素效价减少80%。1955年WHO曾做过这样的研究，用光照射过的结素为接种卡介苗的学生做测定，同时设对照组。结果发现光照组90%以上反应减弱，较对照组相差最大达8mm。b、温度：保存温度偏高可使结核蛋白变性而降低效价，时间长了则结素会完全失效。c、技术：注射剂量不足，未摇均匀，注射较深、验看不仔

7、细不熟练等。1．时间：72小时。2．方法：一看、二摸、三量。看局部有无红晕、双圈、水泡等。对衣袖较紧者，撸起袖子时要稍等片刻再观察，否则会误为阴性。用手指上下、左右轻轻来回触摸，不能挤捏，容易造成疼痛和假阳性。触摸后用尺测量硬结边缘，根据手臂的纵横径垂直交叉各测量一次，以毫米为单位记录，如10×12mm。3．计算记录硬结平均直径：横径+纵径/2。六、观察4．结果标准：我国现将结素试验反应结果分为三类：阴性：无硬结或硬结平均直径＜5mm；阳性：硬结平均直径5-19mm；强阳性：硬结平均直径≥15mm（成年人

8、为20mm），或有双圈、水泡、溃疡、皮疹等。如无20mm，但有双圈、水泡、溃疡、皮疹等也为强阳性。结素试验结果定性与定量之间的关系：“－”——硬结平均直径＜5mm或无硬结；“＋”——硬结平均直径5-9mm；“＋＋”——硬结平均直径10-14mm；“＋＋＋”——硬结平均直径15-19mm；“＋＋＋＋”——硬结平均直径≥20mm，或有水泡等。1．2-8℃冷藏，避光保存，不能直接放在冰上，不与其他药物混放。2．安瓿打开后1小时内用完