外周血单核细胞HLA-DR表达与脓毒症的关系.doc

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1、外周血单核细胞HLA-DR表达与脓毒症的关系作者：王兆丰黄俊军陈松劲【关键词】细胞　　脓毒症（sepsis）是指由感染引发的全身炎症反应综合征。可能并不像以往的“过度炎症反应”，更多的是由于“过度抑制”参与其中；有学者［１］认为在初期炎症反应之后会导致单核细胞失活所致的免疫功能不全，称之为免疫麻痹。　　1资料与方法　　1.1一般资料2006年1至6月健康体检人群为对照组20例。ICU病房患者（包括创伤烧伤、大手术和胰腺炎等）67例，男39例，女28例。将其分为A组（非脓毒症）、B组（符合脓毒症但未达到严重脓毒症诊断标

2、准）、C组（符合严重脓毒症诊断标准）。诊断标准：脓毒症、严重脓毒症、MODS的诊断标准参考美国胸科医师协会（ACCP）和美国危重病医学会联席会议制定的诊断标准［２］。　　1.2试剂仪器流式细胞仪采用美国COULTER-EPICS-XL型四式荧光流式细胞仪。试剂：法国产，CD14-FITC，HLA-DR-PE，同型对照：IgG1-FITC、IgG1-PE。　　1.3标本采集所有待测标本均为当天新鲜采集，含EDTA-K2的真空采血管采集静脉血抗凝全血。　　1.4检测方法对照管加入10μlIgG1-FITCI、IgG1-P

3、E10μl，测定管加入10μlCD14-FITC和10ulHLA-DR-PE，分别加入100μl的EDTA抗凝新鲜全血，室温避光孵育20min，用CoulterQ-PREP溶血仪溶血后上机单核细胞HLA-DR表达百分率［HLA-DR（+）/CD14（+）］及其平均荧光强度［HLA-DR（+）/CD14（+）MFI］。　　1.5统计学处理计量资料均数±标准差(x±s)表示，两样本均数间比较采用独立样本t检验。　　2结果　　各组基本资料见表1；ICU病房患者与健康体检人群外周血比较见表2。A、B、C组外周血比较见表3。3

4、　　表1各组基本资料（略）　　与对照组比较*P<0.01，C组与B组比较#P>0.05　　表2健康体检人群与ICU病房患者比较（略）　　与健康体检人群比较*P<0.01　　表3A、B、C组外周血比较（略）　　B、C组与A组比*P<0.01；**P<0.05，C与B组比#P<0.01；##P>0.05　　3讨论　　ICU病房患者多为创伤、烧伤、大手术等，死亡的主要原因是细菌感染和MODS，其原因可能与免疫系统受损引起的细菌易感性增加有关,作者选择健康人群对照组与研究组年龄、性别

5、、吸烟史无差异，但研究组IL-6和WBC、CRP水平较对照组均有明显升高（P<0.01）,表明ICU病房患者在疾病发生发展过程中细胞因子有过多释放，机体存在着过度的炎症反应；但C组和B组IL-6和WBC、CRP水平比较并无差异，研究组HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI较健康人群对照组有明显下降（P<0.01），且C组与B组比较显著降低（P<0.01），提示HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI是比IL-6和WBC、CRP

6、更早期的、敏感的、可预见的指标。　　单核细胞在抗细菌感染的免疫应答中起关键作用，他不仅可以释放趋化因子、细胞因子、还可表达MHC-II类抗原，单核细胞诱导抗原特异性淋巴细胞活化的能力下降将削弱集体清除外来抗原的能力。HLA-DR抗原在人类单核细胞是最常见的表达区域［３］。HLA-DR与单核巨噬细胞处理抗原后向淋巴细胞提呈抗原的能力有直接关系。能够作为定量的诊断免疫抑制检查，目前可能首推CD14(+)单核细胞的HLA-DR［４］。本研究表明ICU病房患者与正常体检人群比较外周血HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA

7、-DR(+)/CD14(+)MFI显著降低（P<0.01）。其中52例患者（占78％）入住ICU时的外周血单核细胞HLA-DR表达率低于70%，表明ICU患者多有不同程度的免疫麻痹或免疫紊乱。提示ICU病房患者有必要常规检测外周血HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI作为监测免疫抑制的定量指标。2１例患者（占31％）入住ICU时的外周血HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%，其病死率达71％。提示HLA-DR(+)/CD14(+)严重低下患者处于免疫麻痹状态，病情重、预

8、后差。作者认为采用流式细胞术检测HLA-DR(+)/CD14(+)、HLA-DR(+)/CD14(+)MFI，具有准确、简便、快速等优点。此方法还能够定量的诊断免疫抑制，HLA-DR(+)/CD14(+)＜70%提示患者存在一定免疫麻痹，HLA-DR(+)/CD14(+)＜30%作为严重脓毒症的诊断参考指标。【参考文献】　　1RichaRdS,