胰岛素受体在糖尿病大鼠心肌组织中的表达.doc

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1、胰岛素受体在糖尿病大鼠心肌组织中的表达【摘要】目的通过研究胰岛素受体（insulinreceptor，IR）在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型中心肌组织中的表达，探讨IR与糖尿病性心肌病发病机制的关系。方法成年Sprague-Dawley雄性大鼠20只，成实验组和对照组。实验组用链脲佐菌素诱导产生糖尿病模型，4周后对各组大鼠心肌进行IR免疫组织化学染色，观察IR在糖尿病大鼠和正常大鼠左心室心肌细胞中的表达差异。结果发现糖尿病大鼠中心肌间质纤维增生，心肌间微血管壁增厚，IR表达阳性心肌细胞的数目为（9.42±2.32）个/mm2及其光密度均为（66.58±6

2、.32）较正常对照组减少（t分别=17.24、8.75，P均<0.05）。结论糖尿病心肌病可作为一种特异性的病变发展为心肌自主神经系统的紊乱和冠脉血流储备的障碍。IR表达阳性心肌细胞减少可能会造成心肌糖代谢的损害与心力衰竭的发生。【关键词】糖尿病心肌细胞胰岛素受体【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofinsulinreceptor（IR）indiabeticmodelinducedbystreptozo-tocin.MethodsTwentyadultmaleSprague-Dawleyrat

3、sweredividedintotwogroupsatrandom.Indiabeticgroup，theratswereinducedtodiabetesbystreptozotocininjection.Aftercontinuousfeedfor4weeks，theseanimalswerekilledandtheheartsweretakenout.ThefreezesectionsofthesetissueswerestainedwithIRimmunohistochemistrymethod.ResultsComparedwithcontro

4、lgroup，Wefoundfibrosisofmyocardialcell，microvesseldissepimentthickeningandthedensitiesandnumbersofIRimmunostainingpositivemyocardialcellinleftventricleshowedasignificantdecreaseintheheartofdiabeticrats（t=17.24，8.75，P<0.05）.ConclusionDiabetescardiomyopathywilldeveloptoautomatic

5、nervousdisorderinmyocardiumandcoronaryarterybloodcurrentdisturbance.Thedown-regulationofIRintheleftventriclemyocardiumindiabeticmodelmayrelatetopathologicchangesofdiabeticheartdisease，suchasmyocardialglycometabolismimpairmentandmyocardialfailure.【Keywords】diabetes;myocardialcell;

6、insulinreceptor1材料与方法1.1材料Sprague-Dawley雄性大鼠20只（由浙江大学实验动物中心培育），体重200～3400g，6月龄。试剂包括:链脲佐菌素（STZ）（由美国SIGMA公司生产）、Medisense血糖仪（由美国雅培制药公司生产，OptiumQA2583-3364）、兔抗大鼠IR多克隆抗体（由中国武汉博士德公司生产）、生物素标记的羊抗小鼠IgG及抗生物素蛋白—辣根过氧化物酶复合物（由中国武汉博士德公司生产）。采用UTHSCSAImageTools3.0（由美国德克萨斯大学医学院开发）图像分析处理系统进行分析。1.2方

7、法1.2.1糖尿病模型的建立和分组Sprague-Daw-ley雄性大鼠20只随机分为两组:正常组和糖尿病组，每组10只。大鼠禁食10h后，正常组大鼠尾静脉注射pH4.6，0.1mmol/L枸橼酸钠缓冲液，剂量为3ml/kg。糖尿病组大鼠尾静脉注射1%链脲佐菌素枸橼酸钠缓冲液（pH4.6，0.1mmol/L），剂量为3ml/kg。48h后尾静脉取血，测定其空腹血糖及尿糖，将血糖高于16.7mmol/L，尿糖++以上的大鼠定为糖尿病模型。至此，糖尿病模型建立成功，以后每周测尿糖，每2周测血糖［4］。1.2.2两组动物处死前以1%戊巴比妥钠（40mg/kg）

8、麻醉，打开胸腔，经左心室向升主动脉内插管灌注0.9%氯化钠注射液及4%冷多聚甲醛