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时间:2017-11-12
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1、www.themegallery.com毛细管电泳——质谱联用技术在现代中药中的应用主要内容毛细管电泳分离分析原理CE-MS技术的分类CE-MS应用进展总结和展望5234前言11.前言:中药组成十分复杂,有效成分不明确、含量低、药理作用复杂难监测等原因,发展高效、高灵敏、高通量的分析鉴定手段具有重大意义。毛细管电泳逐渐进入了中药分析的领域,为中药分析开辟了一个新的天地,中药的有效成分中如生物碱、多糖等在非水毛细管电泳中已得到了良好的分离分析。电泳迁移电渗迁移分离原理2.毛细管电泳分离分析原理分离原理3.CE-MS的分类按接口技术类型不同按毛细管电泳类型不同在线离线非水毛细管电泳(NAC
2、E)毛细管等电聚焦(CIEF-MS)CGE-MS法(凝胶毛细管电泳)其他电喷雾电离技术电感耦合等离子体(CE-ICP-MS)技术飞行时间质谱(TOFMS)三重四极杆质谱(TQ-MS)离子阱质谱(IT-MS)3.CE-MS的分类按接口技术类型不同在线技术离线技术3.1在线技术:CE-MS在线结合的仪器主要包括三个部分:即CE系统,CE-MS接口和MS检测器。目前,成功地应用于CE-MS接口中的离子化技术有连续流-快原子轰击(CF-FAB)、离子喷雾(IS)、电喷雾(ESI)、大气压化学电离、基质辅助激光解吸离子化和等离子体解吸离子化技术等。其中电喷雾电离是最常用、最成熟的技术。3.1.1
3、电喷雾电离技术3.1.1电喷雾电离技术优点灵敏度高ESI—MS分析在中草药定量分析上具可行性和优越性,且定性简单快速。可测定生物大分子CE—ESI—MS在二维分离技术上有很大的优越性。可用于结构鉴定3.1.1电喷雾电离技术电喷雾接口可分为无鞘流式电喷雾接口和鞘液体接口。稳定性差Descriptionofthecontents毛细管柱使用寿命短3.1.1电喷雾电离技术无鞘流电喷雾接口的缺点有:3.1.1电喷雾电离技术3.1.1.2鞘液体接口:金属接口(喷雾杆)具有三层套管结构:内层中插入普通毛细管,与最初设计不同的是中间层采用了液体鞘流技术,鞘液体从中间层流出,与毛细管中流出的液体混合,
4、解决了毛细管末端电接触的问题,同时可以控制鞘液体流速以增大进入ESI的液体量,补给足够的液体基质,形成稳定的电喷雾。3.1在线技术小结:优点:CE-MS在线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度快等优点,其应用要比离线联用广泛缺点:a.限制离子源的使用,仅电喷雾等几种方法可选b.常不允许CE采用其最佳缓冲条件,限制其优势的发挥c.CE出峰很快,欲进行二级质谱研究,时间常不够,限制结构测定能力发挥此外CE-MS在线联用需要设计合适的接口,能够将已分离的样品全部转移到质谱仪中,同时实现样品快速高效的离子化。因此,CE-MS在线联用接口技术是研究的重点。3.2离线技术优点:a.操作方便,
5、特别是允许CE按所需要优化其分离条件b.对离子化方法没有限制缺点:关键是对已分离样品的有效收集,并不涉及真正意义上的联用接口技术3.CE-MS的分类非水毛细管电泳(NACE)毛细管等电聚焦(CIEF-MS)CGE-MS法(凝胶毛细管电泳)其他方法按毛细管电泳类型不同3.1非水毛细管电泳(NACE)释义:非水毛细管电泳(non—aqueouscapillaryelectrophoresis,NACE)法是CE的一个分支,它没有严格的定义,主要是指以有机溶剂完全替代水作电解液的溶剂这种情况。目前,NACE应用的研究热点集中在有机溶剂、电解质、检测器的选择以及方法的优化等方面。分析不易溶于水
6、、易溶于有机溶剂的物质在水中难以进行反应的研究分离在水溶剂CE中淌度十分相似的物质Vision01Vision03Vision02Vision03适用范围3.1非水毛细管电泳(NACE)分离效率高,分析时间短3.1非水毛细管电泳(NACE)检测手段多降低峰宽并改善拖尾提高被分析物的回收率由于以有机溶剂完全替代水作电解液,所以有一定局限性。优点不足3.2毛细管等电聚焦(CIEF-MS)是新近出现的技术,技术尚不成熟,未得到广泛应用优点不足给复杂生物大分子混合物的分离和结构阐述提供了一种强有力的工具3.3凝胶毛细管电泳(CGE-MS)分离和鉴定生物样品中的低聚核苷酸以及生物碱、黄酮及其苷、
7、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物。特点适用特别适用于缓冲液和相对高浓度的液体的分析,使其不会流出CE柱。3.4其他方法毛细管区带电泳(CZE)、胶束电动毛细管色谱(MEKC),也适用于生物碱、黄酮及其苷、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物的分离。4.CE-MS应用进展TextinhereTextinhereTextinhere123生物大分子及相关物质分析天然产物中活性和毒性成分分析食品
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